簡要描述:無血清細(xì)胞凍存液 Plus PZ210R,Cell Freezing Medium Plus (1x),是一種化學(xué)成分明確、無動物源成分、使用醫(yī)藥級原料的即用型細(xì)胞凍存液,尤其適合淋巴細(xì)胞和干細(xì)胞的凍存。
品牌 LeapWal 貨號 PZ210R 供貨周期 現(xiàn)貨 主要用途 淋巴細(xì)胞、干細(xì)胞凍存 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 規(guī)格 100ml
Cell Freezing Medium Plus (1x)
Especially suitable for lymphocyte and stem cell cryopreservation
Catalog Number:PZ210R
01/產(chǎn)品概述
細(xì)胞藥物作為繼化學(xué)藥、生物藥之后出現(xiàn)的新型藥物在臨床上的應(yīng)用越來越廣泛。尤其,干細(xì)胞治療和免疫細(xì)胞治療在退行性、損傷性、遺傳缺陷性疾病以及腫瘤的治療中具有巨大的優(yōu)勢和廣闊的發(fā)展前景,而高效安全的細(xì)胞制劑是細(xì)胞治療中的關(guān)鍵因素。在細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞凍存是最關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一,尤其在細(xì)胞治療、細(xì)胞存儲中對細(xì)胞凍存更有特殊要求。
傳統(tǒng)的程序降溫法使用的凍存液主要配方為培養(yǎng)基、血清、DMSO。血清大多采用胎牛血清,含有動物源性物質(zhì),成分復(fù)雜,血清中未知成分和病毒等感染物質(zhì)會給凍存帶來影響與風(fēng)險。該方法在科研上廣泛使用,但是顯然已經(jīng)不能適應(yīng)現(xiàn)今細(xì)胞治療的應(yīng)用場景。
針對干細(xì)胞和免疫細(xì)胞的凍存,LeapWal Biotech推出一款Cell Freezing Medium Plus (1x),是一種化學(xué)成分明確、無動物源成分、使用醫(yī)藥級原料的即用型細(xì)胞凍存液,尤其適合淋巴細(xì)胞和干細(xì)胞的凍存。這款產(chǎn)品操作簡單,無需程序降溫,無動物源性蛋白,不含血清,病毒、病菌和支原體等污染可能性低,不僅能有效、安全地保護(hù)細(xì)胞,同時,使用藥用級原料,所有成分均明確,極大降低批次間差異。適用于干細(xì)胞、免疫細(xì)胞以及大多數(shù)細(xì)胞系凍存。
02/產(chǎn)品組分
組分 | PZ210R |
LeapWalTM Cell Freezing Medium Plus (1x) | 100 mL |
03/保存條件
冰袋(wet ice)運輸。4℃保存,有效期12個月。若長期不用,可-30℃至-10℃保存,有效期24個月。
04/產(chǎn)品特點
即用型細(xì)胞凍存液,無需程序降溫,可直接凍存于-80℃冰箱,長期保存(>5年)
安全性高,無動物源性蛋白,不含血清,病毒、病菌和支原體等污染可能性低
復(fù)蘇后的細(xì)胞存活率優(yōu)異,復(fù)蘇率高達(dá)90% 以上,細(xì)胞活力好
使用藥用級原料,所有成分均明確,極大降低批次間差異
05/實驗流程概要
06/實驗步驟
一:細(xì)胞凍存步驟
1. 選擇處于指數(shù)生長期的細(xì)胞,按照常規(guī)方法收集貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于離心管中。
2. 1000 rpm-2000 rpm,離心5分鐘,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,棄上清液。
3. 加入適量4℃預(yù)冷的LeapWal Cell Freezing Medium Plus(1x) 重懸細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。
? 按照細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存液的量,推薦凍存密度:1x10^6 至5x10^6cells/mL。
4. 將細(xì)胞懸液分裝至已標(biāo)記的凍存管中,建議每管1mL或1.5mL。
5. 直接將細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,可長期冷凍保存。如果想放入液氮中長期保存,需先放入-80℃冰箱至少12小時,方可移至液氮罐中長期保存。
二:凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟
1. 在15 mL離心管中加入5-10 mL平衡至室溫的*培養(yǎng)基。
2. 從-80℃冰箱/液氮中取出凍存的細(xì)胞,立即放入37℃水浴鍋或其他細(xì)胞復(fù)蘇設(shè)備中,迅速解凍。
3. 將凍存管中的細(xì)胞懸液逐滴轉(zhuǎn)移至預(yù)先準(zhǔn)備好的含*培養(yǎng)基的離心管中,1000 rpm-1500 rpm,離心5分鐘,收集細(xì)胞沉淀,棄上清(操作時小心,切勿將細(xì)胞沉淀移去)。
4. 加入適量平衡至室溫的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種到事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中,輕輕搖晃培養(yǎng)容器,使細(xì)胞分布均勻。
5. 鏡檢細(xì)胞后,可根據(jù)各自研究的需要和方法進(jìn)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。培養(yǎng)5-24h后,觀察細(xì)胞狀態(tài),可視情況更換新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液。
07/適用范圍
LeapWal Cell Freezing Medium Plus(1x) 適用于干細(xì)胞、免疫細(xì)胞以及大多數(shù)細(xì)胞系凍存。該款凍存液使用藥用級原料,化學(xué)成分明確,適合細(xì)胞儲存、細(xì)胞治療以及科學(xué)研究等不同場景使用。
08/質(zhì)量控制
LeapWal Cell Freezing Medium Plus(1x) 通過嚴(yán)格的內(nèi)毒素、滲透壓、pH測試和無菌檢測(細(xì)菌、真菌和支原體檢測)。
09/注意事項
1. 若長期不用,本產(chǎn)品可-30℃至-10℃保存,再次使用時,請在2-8℃融化LeapWalTM Cell Freezing Medium Plus(1x),避免反復(fù)凍融。
2. 使用LeapWalTM Cell Freezing Medium Plus(1x) 凍存細(xì)胞后,應(yīng)盡量減少凍存細(xì)胞在外存放時間,盡快移入-80℃超低溫冰箱長期保存。
3. LeapWalTM Cell Freezing Medium Plus(1x) 尤其適合淋巴細(xì)胞或干細(xì)胞凍存,建議使用本產(chǎn)品凍存細(xì)胞時,先對其進(jìn)行試驗性凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng)的預(yù)實驗,確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存。
4. 該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時間不宜過長,以免影響凍存效率。
5. 免責(zé)聲明: 本公司將不為任何不正當(dāng)使用此產(chǎn)品所發(fā)生的意外負(fù)責(zé)。
6. 為了您的健康安全,請規(guī)范操作,穿戴實驗服與手套開展實驗。
7. 本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及治療。
10/實驗案例分析
一、凍存細(xì)胞復(fù)蘇存活率檢測
1. 選擇處于對數(shù)生長期的淋巴細(xì)胞,按照常規(guī)方法收集細(xì)胞于離心管中。
2. 1000 rpm,離心5分鐘,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,棄上清液。
3. 加入適量4℃預(yù)冷的LeapWalTM Cell Freezing Medium Plus(1x) 、K公司凍存液、B公司凍存液分別重懸細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。凍存密度為1x106 cells/mL。
4. 將細(xì)胞懸液分裝至已標(biāo)記的凍存管中,每管1mL,放入-80℃冰箱中,冷凍保存。
5. 凍存12個月后,進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇,對復(fù)蘇后的細(xì)胞進(jìn)行臺盼藍(lán)染色,統(tǒng)計細(xì)胞存活率。
二、凍存細(xì)胞復(fù)蘇生長曲線檢測
1. 選擇處于對數(shù)生長期的淋巴細(xì)胞,按照常規(guī)方法收集細(xì)胞于離心管中。
2. 1000 rpm,離心5分鐘,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,棄上清液。
3. 加入適量4℃預(yù)冷的LeapWalTM Cell Freezing Medium Plus(1x) 、K公司凍存液、B公司凍存液分別重懸細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。凍存密度為2x105 cells/mL。
4. 將細(xì)胞懸液分裝至已標(biāo)記的凍存管中,每管1mL,放入-80℃冰箱中,冷凍保存。
5. 凍存1個月后進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇,對復(fù)蘇后的細(xì)胞進(jìn)行臺盼藍(lán)染色,繪制生長曲線。
11/其他相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
LeapWal Cell Freezing Medium (1x) | PZ110R | 100 mL |
LeapWal CCK-8 試劑盒 | P11110 | 1 mL |
P11110-F | 1 mL x 5支 |